PacBio Sequel 是PacBio公司在2015年10月推出了體積更小,重量更輕,數據通量更高,實驗成本更低的新型號單分子測序儀。Sequel仍然采用PacBio的經典技術SMRT,不同之處在於,原來為了檢測SMRT Cells上麵的15萬個ZMWs(中的熒光,需要龐大的激光光路及檢測係統,以便同時拍攝15萬個ZMW孔中的熒光變化。而在新的Sequel係統上,這一部分光路檢測係統被內置於SMRT Cells之中,從而節約了大量儀器空間,而且擴展到了100萬個ZMWs
2015年10月PacBio公司推出了體積更小,重量更輕,數據通量更高,實驗成本更低的新型號Sequel單分子測序儀。這一款測序儀相較於之前的大塊頭RS II係統瘦身不少,其體積和重量僅為過去的1/3左右。
Sequel仍然采用PacBio的經典技術SMRT(Single Molecule Real-Time Sequencing),不同之處在於,原來為了檢測SMRT Cells上麵的15萬個ZMWs(Zero-Mode Waveguide, 零模波導孔)中的熒光,需要龐大的激光光路及檢測係統,以便同時拍攝15萬個ZMW孔中的熒光變化。而在新的Sequel係統上,這一部分光路檢測係統被內置於SMRT Cells之中,從而節約了大量儀器空間,而且擴展到了100萬個ZMWs。
另一方麵,在節約了大量的光學檢測部件的空間以後,原來外置的數據處理器Blade Center與主機合二為一,內置於下部空間,成為一個整體,其體積減小至隻有原來的1/3。相對於Illumina Hiseq的體積也小11%。重量也從過去的一噸多到現在的不足400kg。
Sequel在延續SMRT技術的同時,保持了長讀長(平均10-15k)能力和出色的一致性準確率(30×coverage, QV 50)。因為ZMWs數量從15萬提升至100萬,每個Cell的產出數據通量也有了7倍左右的提升。采用目前的P6-C4試劑,平均每個SMRT Cell可產生5-10Gb的數據,按每個Gb的數據產出成本顯著降低。
更為重要的是,除了成本的降低,Sequel的測序能力大幅度提升。以基因組大小為1G的樣本為例,做30×的De novo Assembly,過去需要30個Cell左右,現在隻需4--5個Cell即可。
Sequel配套的軟件也是與時俱進。在Sequel係統中,采用了全新的SMRTLink軟件界麵,包含Sample Setup, Run Design, Run QC, Data Management以及SMRTAnalysis等模塊。不同顏色代表不同模塊,從樣本設置,實驗設計,質控,數據管理以及多種應用的數據分析一應俱全。